二氢玉米素，主要是从还没熟的羽扇豆的籽中提取的。它是化学式为C10H15N5O，分子量为221.26。它是一类6-烷基氨基嘌呤的有机化合物，化学结构包含一个嘌呤环和一个氨基丁醇侧链。嘌呤环上的氮原子和氨基丁醇侧链上的氨基形成酰胺键，具有刺激花芽形成细胞分裂素的作用。广泛的应用在农业生产中，作为植物生长调节剂使用。促进细胞分裂，控制根芽的分化形成，消除顶端优势，延缓叶片衰老。

检测二氢玉米素含量的方法，主要有高效液相色谱（HPLC）法、液相质谱联用（LC-MS）法、酶联免疫吸附（ELISA）法等。

1.高效液相色谱（HPLC）法

前处理：就是将植物样品，研磨成粉，加入有机溶剂，比如甲醇、乙腈等来提取。提取液，经过离心出来，上清液过滤，就是准备测定的样品溶液了。

色谱条件：用C18反相色谱柱，以甲醇和水或乙腈和水为流动相，0.8-1ml/min的流速，随时可以调节；紫外检测器，波长可以看，有用268nm的，仅供参考。进样量也是比较重要的，常规的是10-20ul。

标准曲线：外标法测二氢玉米素含量，就需要使用标准品。将标准品进行稀释溶解，并用适当的溶剂，梯度稀释6个浓度点，依次上机测定色谱峰。根据色谱峰的出峰情况，可以调节参数，或进行后续的计算。以色谱峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，得到回归方程，相关系数要大于0.999，确保有符合要求的重复性。

数据处理：这里需要先对样品进行测定，色谱条件和标准品测的一样，软件记录色谱峰。对色谱峰面积进行积分，根据回归方程，可以计算出样品中的二氢玉米素含量。这里要注意的是，样品的稀释倍数，标准品的回收率，便于更准确的计算出含量。

2.液相质谱联用（LC-MS）法

前处理的步骤和色谱条件，和HPLC测定的相同，目的是能够将二氢玉米素有效分离出来。分离出来的化合物，进入到质谱的离子源。在这里，化合物会被打碎，碰撞成碎片离子。在质谱电磁场的作用下，根据质荷比（m/z）的不同，在质量检测器上形成质谱峰，确定母离子和子离子。

根据质谱图中的二氢玉米素的特征离子峰，可以对它进行定性分析。通过对峰面积进行积分，制作标准曲线，可以进行定量分析。

3.酶联免疫吸附测定法（ELISA）

这是一种双抗体夹心法，在微孔板上有固定游二氢玉米素的抗体，加入样品或标准品。二氢玉米素和板上的抗体结合起来，再加入酶标记物抗体，形成一种复合物。这个时候，还是刚开始。接着，要对微孔中的溶液进行冲洗，剩下的就是固定在微孔底部的抗体-抗原-抗体标记物。

加入样品和标准品需要温育，加入二抗的时候也要温育，为了能够让样品和两个抗体有效的结合起来。第一个抗体是为了将样品中的二氢玉米素固定在板子上，加入底物溶液后，酶催化底物产生颜色变化，测定吸光度值。根据标准曲线，可以计算出样品中的二氢玉米素的含量。