蔗糖酶，又称β-D-呋喃果糖苷水解酶，特异性催化非还原糖中的β-D-呋喃果糖苷键水解，广泛存在于动植物和微生物中，尤其在酵母中较多。它在植物的运输、储藏和代谢过程中起重要作用，并调节渗透压和传递信号。测定土壤中的蔗糖酶活力主要使用比色法、高效液相色谱（HPLC）法和电化学法。比色法基于3,5-二硝基水杨酸与酶解生成的还原糖反应生成棕色化合物，通过测定吸光度制作标准曲线，定量测定蔗糖酶活力。HPLC法则通过测定蔗糖酶催化水解生成的葡萄糖或果糖含量，推算蔗糖酶活力。
蔗糖酶，又名 β-D-呋喃果糖苷水解酶，能够特异性地催化非还原糖中的β-D-呋喃果糖苷键水解，具有相对专一性。不能能够催化蔗糖水解为葡萄糖和果糖，也能催化棉子糖，水解生产二糖和果糖。蔗糖酶广泛存在于动植物和微生物中，酵母中比较多。蔗糖酶在植物的运输、储藏、代谢过程中发挥着重要的作用，并在一定程度上调节渗透压、并传到信号。
测定土壤中的蔗糖酶，主要方法有比色法，高效液相色谱（HPLC）法，电化学法等。
1.比色法
这里的比色法，就是基于3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂和酶解生成的还原糖，比如葡萄糖或果糖，发生反应生成棕色化合物。通过测定吸光度，制作标准曲线，可以定量测定样品中的蔗糖酶活力。
样品制备：称取试样2g，置于50ml三角瓶中，注入15ml 8%蔗糖溶液、5ml pH5.5磷酸缓冲液和0.25ml甲苯，摇匀后放入恒温箱在37℃下培养24小时。取出后迅速过滤，滤液供蔗糖酶的测定。
标准曲线制作：吸取葡萄糖标准溶液到容量瓶中，加入3,5-二硝基水杨酸并在沸水浴中加热，冷却后梯度稀释6个点。在分光光度计，波长为508或540nm处测定吸光度值。根据标准溶液浓度和对应吸光度值的关系，可以绘制出标准曲线，计算回归方程。
样品测定和计算：从样品滤液中吸取1ml，注入容量瓶中，加入3,5-二硝基水杨酸，和标准品同样的条件下，测定吸光度值。根据实际情况，可以对样品溶液进行稀释，测定的吸光度值和标准曲线，可以计算出样品中的蔗糖酶活力，考虑稀释倍数。
2.高效液相色谱法
HPLC测定的是方法，其实是测蔗糖酶将蔗糖或果糖催化水解成葡萄糖或果糖，通过液相色谱测定葡萄糖或果糖的含量，进而来推算出样品中的蔗糖酶活力。
