山柰酚是一种黄酮类的化合物,最早是从植物山柰的根茎中提取出来的,后来发现各种水果、蔬菜也能获取,比如椰菜、茶叶、柚子等。这种化合物在植物体内起到了很强的抗氧化性的能力,能够延缓食物腐烂变质,防止酒精中毒等作用。大家都知道,当皮肤的细胞被氧化的时候,就会出现皱纹或衰老等情况。氧化的作用,就像绿色的树枝变得枯萎,有效的营养物质被消耗,水分也会缺失。人们发现,山柰酚具有抗氧化性能,还能抗病毒,广泛的应用在食品、医药等领域。

今天呢,我们暂且不谈山柰酚是如何抗氧化,怎么延缓衰老的。这里重点要说的是,如何从植物样品中检测出山柰酚的含量,用于科学研究方面。检测化合物,在实验室里我们会使用到高效液相色谱法,它也是目前应用较为普遍的。当然,为了更准确的、更灵敏的检测山柰酚的含量和结构,也会搭配质谱检测器获得信号。

使用液相色谱来检测山柰酚,就必然会用到山柰酚的标准品,只有在色谱图中有对照才能知道它就是山柰酚。先制备山柰酚标准储备液,再使用75%的甲醇溶液对它进行梯度稀释,分别配置成2.0μg/mL,5.0μg/mL,10.0μg/mL,20.0μg/mL,50.0μg/mL,100.0μg/mL的标准系列工作液。色谱柱采用的是C18的柱子,流动相为乙腈:0.4%磷酸溶液,流速设定为1.0mL/min,柱温30℃,进样量10ul,采用紫外可见检测器,可以通过验证的方法来获得最佳的检测波长。通过上机检测,可以获得浓度和信号对应关系的标准曲线,计算出回归方程,重复性。

下面就是要对样品进行处理,在这个过程中是要非常认真的。它看起来是准备工作,却能够决定了结果的准确性。液相色谱仪检测数据是可以看到的,但在前期的提取和处理阶段,如果处理稍微不恰当,就可能会出现结果偏差。取适量的粉碎了的植物样本,精密称量并记录下来。放在锥形瓶中,精密加入75%的甲醇溶液50ml,加热回流1个小时,浓缩提取(过程略)。也可以采用乙腈,提取后用离心过滤、浓缩并调节PH的方法。液相进样检测,根据色谱峰和色谱面积,计算出样品中所含有的山柰酚含量。