氨基酸是生物大分子蛋白质的基本单位,分为α、β、γ等类型,共22种。它们在人体内合成蛋白质,参与多种生物功能,并可转化为其他物质。氨基酸的检测通过气相色谱法进行,包括样品前处理、衍生化处理、气相色谱分析和标准曲线绘制等步骤,以确定氨基酸的含量。
氨基酸是一类两性有机化合物,是生物大分子蛋白质的基本组成单位。化学式为R-CH (NH2)-COOH,R为侧链基团。依据氨基在碳链上的不同位置,可以将氨基酸分为α,β,γ等氨基酸。天然蛋白质的氨酸是α氨基酸,目前共22种。按化学结构来分,有脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸、杂环氨基酸、杂环亚氨基酸。按营养学来分,有必需氨基酸、非必需氨基酸。氨基酸在人体内能够合成组织蛋白质、参与生物体功能,变成酸、激素、抗体、肌酸等物质,或转变为碳水化合物和脂肪,也能氧化成二氧化碳和水,产生尿素。

气相色谱(GC)法测氨基酸含量,检测原理:将氨基酸转变为适合于气相色谱分析的衍生物,比如三氯乙酰基二丁酯。将分析物注入到色谱柱的进样口中,在载气的带动下通过色谱柱,分析物分子会受到柱壁或柱中填料的吸附,使得通过柱的速度降低。每一种类型的分子都有自己的通过速率,不同组分的物质会在不同的时间达到柱的末端,从而实现分离。检测器确定每一个组分到达色谱柱的时间,以及每一个组分的含量。通过流出的顺序和保留时间,来确定物质的含量。

检测步骤
1.样品前处理:将样品中的蛋白质水解为氨基酸,并进行必要的纯化和浓缩处理。
2.衍生化处理:为了提高检测的效率,增强氨基酸的分离效果,以及检测的灵敏度,需要对氨基酸进行衍生化处理。比如甲氧基化、甲氨基化等,使得氨基酸转化为具有挥发性的衍生物。
3.气相色谱分析:调节检测器,载气速率,进样口温度,温度速率等参数,将衍生化后的氨基酸样品注入到气相色谱仪中,经过进样系统、分离系统和检测系统,进行定量测定,并记录色谱图和数据。
4.标准曲线:将标准样品配制成不同浓度的标准系列,然后在与欲测组分相同的色谱条件下进行等体积准确量进样,测量各峰的峰面积或峰高,并用峰面积对样品浓度绘制标准工作曲线,计算回归方程。根据测定样品中色谱峰面积,计算样品中氨基酸的含量。