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植物中多胺含量测定
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-05-30 | 211 次浏览 | 分享到:

多胺是一类含有两个或多个氨基的化合物,比如腐胺、精胺、亚精胺等,能够阻止植物组织的衰败,有助于继续生长。多胺主要是由鸟氨酸、精氨酸在鸟氨酸脱羧酶、精氨酸脱羧酶的作用下合成的。它能够促使细胞膜上的蛋白质或磷脂结合,使得细胞膜更稳定,而不容易衰败破裂。检测植物中的多胺含量,通常情况下用的是高效液相色谱(HPLC)法。



HPLC检测植物多胺含量,需要准备仪器和试剂,确定色谱检测条件,对样品进行处理,制作标准曲线,计算样品中多胺的含量。


检测多胺含量用的是C18的色谱柱,紫外检测器,以甲醇:水=60:40为流动相,甲醇为色谱纯,水为超纯水。对于检测波长、流速、柱温等条件,可以通过设计参考的方法,选择最优的、与之匹配的检测条件。比如检测波长230nm,柱温30℃等。我们要做标准曲线的,因此标准品肯定是不能缺少的,腐胺,精胺,亚精胺。



对于植物样品的处理,已经有方法的就按成熟的方法操作。每个操作步骤都是合理的,准确的,科学的。比如在冰浴中研磨,用高氯酸浸提离心。再加苯甲酰氯、NaOH、37℃水浴。接着加饱和NaCl和乙醚萃取,离心后真空干燥,最后用甲醇溶解过滤。


标准曲线的制作,是整个检测过程中不可缺少的。它是将3种多胺的标准品,都按上面的方法进行苯甲酰化,配制成6个梯度浓度标准溶液,进样测定其峰高和峰面积。以峰面积和进样量相对照,制作标准曲线,计算回归方程和相关系数。对样品进行同样条件下检测,记录测定的峰高和峰面积,并根据标准曲线计算样品中的多胺含量。


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