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实验菜鸟选择elisa试剂盒的正确步骤

发布者:admin

发布时间:2020-06-19

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点击次数: 更新时间:2020-06-19 【打印此页】 【关闭

ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了广泛的应用,然而实验新手们面对各种各样、动则上上千种的ELISA试剂盒,内心应该是崩溃的。

  各种厂家、品牌,各种种属,各种因子,琳琅满目,质量良莠不齐,如何浪里淘金,选择既符合研究需求,又品质上乘的 ELISA 试剂盒呢?

  学霸姐姐教你几招,一眼“相中”最可靠、最合适的那个ELISA试剂盒!

  首先,你要明确研究种属:

  一般来说,厂家都会在产品名称上标明种属,且为首个单词,检索种属的常用语言为英文。

  如果您需对不同物种的同一因子进行定量,建议优先寻找适用于多个种属的 ELISA 试剂盒,产品介绍中会注明「Multi-species」。

  其次,要明确样本类型:

  不同厂家验证样本类型不同,即使同一厂家不同试剂盒,其验证样本类型也不尽相同。特别是复杂的血浆样本,根据样本处理方式的差异,分为 EDTA 血浆、肝素抗凝血浆和柠檬酸盐血浆,因此购买前需仔细核对。

  第三步:要会预测自己的目标因子的浓度

  一般来说,待测因子可以根据经验或资料获得参考的检测范围,且正常人与疾病状态存在差异。如热门炎症因子 IL-6,正常人血清中浓度为 3.13 pg/mL,病人会显著增高,CAR-T 回输病人血清中的 IL-6 浓度甚至为正常人的 200 倍以上。

  因而,必要时进行样本的稀释及选择合适检测范围的试剂盒极其重要。

  若浓度太低,可选择高敏试剂盒;若不确定待测浓度或样本间浓度差异较大,建议使用检测动态范围更宽的化学发光法ELISA试剂盒。

  如同样为 IL-6 ELISA 试剂盒,各类型检测范围差异较大,需要根据实际情况选择合适的试剂盒。

  第四步:检查试剂盒进行过哪些质控

  质控数据在说明书中即可找到,在购买前检查试剂盒是否进行过严格的质控实验,包括批次内(Intra-Assay)及批次间(Inter-Assay)、掺入回收实验、线性稀释实验及交叉反应测试等,每个数据最好都看一下,确保超强的结果重现性及准确性。

  第五步:确定需检测的因子数量

  如果待测因子超过 5 个,且样本量较小时,单因子 ELISA 检测方法并不是最佳选择。

  建议考虑多因子检测方法,如固相芯片(样本数量一般 5 个以内,检测指标可达上百个)及 Luminex 液相芯片方法 (检测样本多达 80 个,检测指标多达 50 个)或微流控 ELISA 检测系统 Ella。

  可节约样本及时间成本,也可保证检测结果准确。

  第六步:预算评估

  预算往往是大家优先考虑的,实际上,不能够一味讲究产品价格,更需要考虑性价比。生物学是极其严谨的科学,一致性的实验结果是基金、文章等评审过程中必不可少的因素,即使低廉的价格,不能够完美重现结果,也是资源的另一种浪费。

  怎么样,你学会了没?


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