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17种氨基酸

品牌: | 货号:YX-10001

氨基酸,是含有碱性氨基和酸性羧基的有机化合物,羧酸碳原子上的氢原子被氨基取代后形成的化合物。氨基酸分子中含有氨基和羧基两种官能团。与羟基酸类似,氨基酸可按照氨基连在碳链上的不同位置而分为α-,β-,γ-...w-氨基酸,但经蛋白质水解后得到的氨基酸都是α-氨基酸,而且仅有二十几种,他们是构成蛋白质的基本单位。 [1]  氨基酸是构成动物营养所需蛋白质的基本物质

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氨基酸提取方法:

称取0.2g样本,加入1.5mL0.1%苯酚的6mol未检出L盐酸水溶液,研磨成浆后移入EP管中。然后将EP管置于100℃烘箱中水解20小时左右。取出冷却,取水解液1mL,氮吹仪吹至近干,加入1mL0.1mol未检出L的稀盐酸溶解,过滤膜待衍生。

氨基酸的衍生:

(1) 取上述待衍生的清液200ul以及氨基酸标准品溶液200ul,分别置于1.5mLEP管中;

(2) 往每个离心管中准确加入正亮氨酸内标溶液20ul;

(3) 分别加入三乙胺乙腈溶液200ul(确保PH>7),异硫氰酸苯酯乙腈溶液100ul,混匀后25℃下放置1小时。

(4) 然后加入正己烷400μl至离心管,摇晃后放置10min。

(5) 取下层溶液,0.45μm针式过滤器过滤。

HPLC液相条件:

安捷伦 2100 高效液相色谱仪,安捷伦 C18反相色谱柱(250mm*4.6mm,5μm)流动相A:称取7.6g无水乙酸钠,加水925mL,溶解后用冰醋酸调节pH至6.5,然后加入乙腈70mL,混匀,用0.45um滤膜过滤;流动相B:80%乙腈水溶液;  1.开启电脑、检测器和泵,安装上色谱柱,打开软件,在方法组中设置进样量10μL,流速1.0 mL未检出min,柱温40℃,走样时间为45min,设置完毕保存方法组。

标品图谱

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样品图谱

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图片关键词

氨基酸:高效液相色谱法(HPLC):柱前衍生:柱后衍生:综述:研究进展

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